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尊龙凯时基质胶使用指南

发布时间:2025-02-09   信息来源:尊龙凯时官方编辑

尊龙凯时的Matrigel基质具有显著的色差变化(从淡黄色到深红色),这种现象主要是由酚红和碳酸氢盐与二氧化碳反应所引起的。然而,当与5% CO2环境平衡后,色差会显著减轻。冷冻和解冻后,需轻轻摇晃试剂瓶以确保Matrigel均匀分散。所有操作过程都必须在无菌环境下进行,试剂瓶的瓶盖可以用70%乙醇擦拭并自然干燥。为了保证Matrigel均匀分布,建议使用预冷的移液器。在Matrigel基质层的0.5mm厚度表面,细胞可以正常生长,而在1mm厚度的三维基质中,细胞也可以顺利存活和繁殖。需注意的是,过于稀释的Matrigel会形成非胶质的蛋白层,适合细胞贴壁,但不适合进行细胞分化研究。

尊龙凯时基质胶使用指南

此外,冻融后的Matrigel可分装于多个小管中,所有分装必须使用预冷的冻存管,并迅速冷冻以避免多次冻融。在22-35摄氏度的环境中,Matrigel会迅速成胶,因此在4摄氏度冰上过夜的冻融过程必不可少(在4度下,温度升高可能导致部分成胶)。为确保操作的准确性,所有耗材需提前放置于冰浴中,且必须使用预冷的移液管、吸头以及小管进行操作。

在成胶后,Matrigel可在4-24小时后再次呈液态。为了保证尊龙凯时的Matrigel基质膜的成胶性能和稳定性,稀释浓度不应低于1:3,建议用无血清培养基进行稀释,并确保在Matrigel成胶后立即使用。

薄胶成胶方法

1. 冻融后,使用预冷的移液枪头混合Matrigel基质,直到达到匀浆状态。
2. 将所需使用的培养板置于冰上,加入浓度为50μL/cm²生长面积的Matrigel基质。
3. 在37摄氏度下放置30分钟,即可使用。

厚胶成胶方法

1. 冻融后,使用预冷的移液枪头混合Matrigel基质,直到达到匀浆状态。
2. 将所需使用的培养板置于冰浴,将培养的细胞与Matrigel基质混合,再用移液枪头将其悬浮于基质中。加入浓度为150-200μL/cm²生长面积的Matrigel基质。
3. 在37摄氏度下放置30分钟即可成胶,可以将细胞培养在基质中,或者使细胞直接生长在胶的表面。

薄层包被方法

1. 冻融后,使用预冷的移液枪头混合Matrigel基质,直到达到匀浆状态。
2. 根据使用需要,采用无血清培养基稀释Matrigel基质,确定最佳包被浓度。
3. 将稀释的Matrigel基质包被于所需的培养器皿中,确保包被量至少覆盖整个器皿的生长表面。在室温下孵育1小时。

通过以上操作步骤,您将能够在细胞培养中充分利用尊龙凯时的Matrigel基质,提高细胞培养的效率和效果。