本试剂盒专用于科学研究,严禁用于医学诊断。本文将介绍昆虫摇蚊谷胱甘肽转移酶(GST)Elisa试剂盒的使用说明及检测原理。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在已包被adropin(AD)抗体的微孔中,依次添加样本、标准品及HRP标记的检测抗体,随后进行温育并彻底洗涤。通过底物TMB的显色反应,TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色,随后在酸的作用下转变为最终的黄色。样品中adropin(AD)的浓度与显色深浅呈正相关。最后,使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),以计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:采用不含热源和内毒素的试管,操作时避免任何细胞刺激。收集血液后,应以3000转速离心10分钟,迅速并小心分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂。离心3000转30分钟后,取上清。
3. 细胞上清液:同样以3000转离心10分钟,去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量的生理盐水一起捣碎,离心3000转10分钟取上清。
5. 保存:若样本在收集后未及时检测,请按一次用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀充分解冻。
操作注意事项及试剂盒组成
注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂的准备:对于20×洗涤缓冲液的稀释,请用蒸馏水以1:20的比例稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
洗板方法及结果判断
在Excel工作表中,以标准品浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标,绘制标准品线性回归曲线,并依据曲线方程计算各样本浓度值。
本试剂盒的性能仅限于研究用途,使用时请遵循相关实验室操作规程。选择尊龙凯时,我们为您提供高质量的生物医疗产品,助力您在科学研究的道路上取得更大突破。